問:目前尿素氮在臨床檢驗中主要存在哪些問題?
答:主要有四個方面的問題:
試劑穩定性較差。
試劑中酶量不足,特別是NADH的不足。
存在方法學上的缺陷。
一些抗凝劑的不當使用也會導致檢測結果的偏差。
問:尿素氮試劑的穩定性為什么較差,針對這個問題如何解決?
答:尿素氮試劑的穩定性差是由于試劑中NADH的不穩定造成的。NADH容易被氧化,造成吸光度下降,并且目前尚無好的方法能夠使尿素氮試劑中的NADH保持穩定。這個問題可以用標準加以控制,在檢測的過程中經常定標。
問:為什么在臨床檢驗中尿素氮試劑的線性不好,造成BUN高值檢測不出?
答:同上面的問題一樣,原因都出在NADH的穩定性上。NADH被氧化后含量降低無法完成同BUN的偶聯反應。
問:針對NADH含量低的問題,如何解決?
答:根據相關報道,有人建議在試劑中加入正常用量6倍的NADH。
問:BUN檢測方法學上存在什么缺陷?
答:目前尿素氮的檢測方法主要是脲酶-NADH偶聯法,該方法學存在以下2個缺陷:其一,血清中的血氨含量增高的情況下,會同時消耗GLDH和NADH,使得檢測結果不準確;其二,內源性的酶與指示酶GLDH競爭氧化NADH,從而降低了酶促偶聯系統的準確性。
問:尿素氮檢驗方法學上的缺陷如何彌補?
答:目前尚無好的解決方法,但可以根據臨床診斷結果來糾正參數,例如延長延遲時間等。
問:什么樣的抗凝劑會造成檢測偏差?
答:帶氨的抗凝劑會消耗GLDH和NADH,造成檢測結果的正偏差;而含有抑制脲酶活性成分的抗凝劑會造成檢測結果的負偏差。