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傳染病學(xué)輔導(dǎo)資料:艾滋病檢查

時(shí)間:2012-09-20 15:22來源:內(nèi)科主治醫(yī)師考試 作者:lengke 點(diǎn)擊:
  

  艾滋病應(yīng)該做哪些檢查?

  目前檢測HIV的方法有100多種,可以分為抗體檢測和病毒檢測兩大類。

  病毒檢測:包括細(xì)胞培養(yǎng)(病毒分離)、p24抗原檢測和病毒核酸檢測。早期對HIV的診斷主要是通過血清學(xué)試驗(yàn)檢測抗HIV的抗體,間接地診斷HIV感染。隨著生物科技的發(fā)展,近年來分子生物學(xué)方法不斷被應(yīng)用到HIV的檢測中,尤其核酸檢測已經(jīng)成為了HIV實(shí)驗(yàn)室診斷的發(fā)展方向,它可直接檢查HIV RNA,可在發(fā)現(xiàn)血清學(xué)變化之前檢測HIV感染,而且比P24抗原檢測方法更靈敏。

  抗體檢測:HIV抗體一般在人感染后幾周逐漸出現(xiàn),可延續(xù)至終生,血清學(xué)試驗(yàn)分為初篩和確認(rèn)試驗(yàn)。最常用的初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)分別是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫印跡試驗(yàn)(WB)。常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)(WestBlot)、間接免疫熒光法(IFA)。快速檢測方法:明膠顆粒凝集試驗(yàn)、斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)、P24抗原的檢測、分子生物學(xué)方法、RT?PCR檢測法、熒光實(shí)時(shí)PCR檢測技術(shù)、支鏈DNA(bDNA)、連接酶酶促鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(LCR)、核酸序列依賴性擴(kuò)增(NASBA)、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(TMA) 。

  【病毒感染機(jī)制】

  HIV病毒侵入人體后,其表面糖蛋白gp120與細(xì)胞表面受體蛋白CD4以高親和力結(jié)合,吸附到宿主細(xì)胞上;gp120再與宿主細(xì)胞表面輔助受體相互作用,使病毒與宿主細(xì)胞膜更接近;gp41產(chǎn)生一系列構(gòu)象變化,其N端的融合肽片段插入宿主細(xì)胞膜,導(dǎo)致病毒包膜與細(xì)胞膜的最終融合,病毒RNA進(jìn)入細(xì)胞。在HIV感染后,最先能夠監(jiān)測到病毒RNA、然后是p24抗原,最后是抗體。常見的檢測如下:

  1.血液檢查:

  A) 血常規(guī):常有紅細(xì)胞,血紅蛋白降低,呈輕度正色素、正細(xì)胞性貧血。白細(xì)胞常降至4.0×109/L以下。分類中性粒細(xì)胞增加,有核左移現(xiàn)象。少數(shù)表現(xiàn)為粒細(xì)胞減少。淋巴細(xì)胞明顯減少,多<1.0×109/L 。有漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞和含空泡的單核細(xì)胞出現(xiàn)。血小板一般無變化,一旦有變化,血小板可明顯減少。

  B) β2 -微球蛋白和新蝶呤(neopterin) 用放射免疫法(RIA)測定血清β2微球蛋白和新蝶呤。它們是被激活的巨噬細(xì)胞的產(chǎn)物,其血清水平的升高意味著免疫激活,具有與CD4 T細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞百分率、CD4/CD8細(xì)胞比例下降同樣的臨床意義,即預(yù)示病情進(jìn)展至獲得性免疫缺陷綜合征。

  2.免疫系統(tǒng)檢測:

  (1)淋巴細(xì)胞亞群檢查:CD4 T細(xì)胞減少,CD4/CD8比例下降,正常人CD4/CD8之比為1.75~2.1,而獲得性免疫缺陷綜合征患者常<1.0。

  (2)T細(xì)胞功能下降:遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性皮試陰性。體外非特異性有絲分裂原刺激時(shí),淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化降低。T細(xì)胞的細(xì)胞毒作用降低。T細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-2和干擾素γ減少。

  (3)B細(xì)胞功能失調(diào):有不同程度的免疫球蛋白及免疫復(fù)合物升高。出現(xiàn)自身抗體,如產(chǎn)生RF、抗核抗體和抗淋巴細(xì)胞抗體等。

  (4)自然殺傷細(xì)胞活性下降。

  (5)淋巴結(jié)活檢:在獲得性免疫缺陷綜合征的高發(fā)地區(qū)及高危人群中,對腹股溝以外部位的淋巴結(jié)腫大,特別是持續(xù)性頸部淋巴結(jié)腫大的人普遍進(jìn)行淋巴結(jié)活檢是重要的措施,可見到淋巴結(jié)的反應(yīng)性病變和腫瘤性病變等非特異的、但具有一定診斷價(jià)值的病理表現(xiàn)。有的獲得性免疫缺陷綜合征患者,表淺淋巴結(jié)消失,不易做活檢。  

  3.其他 小便檢查常有蛋白尿。血中肌酸酐和尿素氮可升高。

  4.病原學(xué)檢查

  (1)HIV-1的病原學(xué)檢查:

  A) HIV-1血清抗體的檢測:包括抗-gp120及抗-P24,大多數(shù)HIV-1感染者在3個月內(nèi)血清抗體陽轉(zhuǎn)。因而,測定血清抗體是目前確定有無HIV感染的最簡便、快速而有效的方法。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),間接免疫熒光測定(IFA),放射免疫試驗(yàn)(RIA)等。一般多用ELISA法作初查,其靈敏性為99.5%。但由于它是用HIV-1作為抗原進(jìn)行檢測,與淋巴細(xì)胞抗原有交叉抗體,可有假陽性出現(xiàn)。故對初查陽性者,再用硝酸纖維膜免疫印跡試驗(yàn)(Westen blot,WB)確認(rèn)。

  硝酸纖維膜雜交試驗(yàn)特異性強(qiáng),假陽性率極低。其診斷標(biāo)準(zhǔn)是:如ELISA連續(xù)兩次陽性,且WB檢測出現(xiàn)p24,gp41,gp120或gp160條帶中任何兩條條帶陽性者,則可確認(rèn)為HIV感染。如沒有兩條條帶陽性者,則只能診為“未定型”(indeterminate pattern)。這時(shí)可用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測其特異的病毒核酸,或繼續(xù)密切觀察,反復(fù)作上述檢測,以明確診斷。

  B) 檢測病毒抗原:由于抗體出現(xiàn)晚于抗原,因而不能早期診斷。如果在抗HIV-1陽轉(zhuǎn)之前的窗口期篩選獻(xiàn)血員,就會出現(xiàn)假陰性,后果是非常嚴(yán)重的。因此,篩選獻(xiàn)血員最好加測病毒抗原。通常檢測P24,其靈敏性及特異性均較高。既有助于早期診斷,也可用于獻(xiàn)血員篩選、藥物療效考核等。

  C) 檢測病毒核酸:在抗HIV-1陽轉(zhuǎn)之前的窗口期,還可用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測HIV RNA。此法靈敏度更高,檢測周期短,也有助于早期發(fā)現(xiàn)、獻(xiàn)血員篩選、藥物療效考核等。但操作必須十分小心,防止污染,以避免假陽性。

  D) 病毒分離和培養(yǎng):從患者的淋巴細(xì)胞、血液、精液及其他體液中均可分離出病毒,陽性率較高,反復(fù)多次分離陽性率可達(dá)100%。分離的病毒可用CD4 T細(xì)胞培養(yǎng)。但方法復(fù)雜,成本較高,一般只用于實(shí)驗(yàn)室研究。分離或培養(yǎng)到HIV均為確診的依據(jù)。

  (2)HIV-2的病原學(xué)檢查:血清學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)約80%的HIV- 1和HIV-2感染之間存在交叉反應(yīng)。故用于檢測HIV-1感染的ELISA和RIBA法難以確定HIV-2感染。特別是發(fā)生了HIV-l和HIV-2雙重感染時(shí),使診斷更為困難。不過,HIV-2特異的ELISA及WB法藥盒現(xiàn)已有商品出售。在HIV-2流行區(qū),可在檢測HIV-1的基礎(chǔ)上,先用HIV-2特異的ELISA藥盒區(qū)別HIV-1和HIV-2感染,再用HIV-2特異的WB法作確認(rèn)試驗(yàn)。在非流行區(qū),當(dāng)HIV-1試驗(yàn)陽性或弱陽性,而WB法不明確或陰性,或臨床懷疑獲得性免疫缺陷綜合征,而HIV-1試驗(yàn)弱陽性、WB法陰性時(shí),也要用HIV-2特異的ELISA藥盒檢測,以明確診斷。

  近來為了節(jié)省時(shí)間和經(jīng)費(fèi),大部分試劑盒廠家和血庫采用HIV-1和HIV-2抗體聯(lián)合測定。聯(lián)合測定的ELISA模式與HIV-1抗體測定相同,不同的是在包被固相載體時(shí)用HIV-1和HIV-2二種抗原的混合物替代單一的HIV-1抗原。

  【并發(fā)癥相關(guān)檢測】

  本病極易并發(fā)機(jī)會性感染和惡性腫瘤,并常死于這些并發(fā)癥。因此,對本病患者進(jìn)行胸部及胃腸道X線檢查,及早作出機(jī)會性感染和惡性腫瘤的診斷,對及時(shí)治療和延長患者的生命是十分重要的。

  1.消化道X線檢查 胃腸道機(jī)會性感染主要的病原體是巨細(xì)胞病毒,惡性腫瘤仍以卡波齊肉瘤為常見。

  (1)巨細(xì)胞病毒感染:巨細(xì)胞病毒可侵犯胃腸道的任何部位,但以結(jié)腸最為常見,個別病例可累及整個胃腸道。巨細(xì)胞病毒性食管炎或胃炎在X線片上表現(xiàn)為黏膜皺襞腫脹,小的充盈缺損及淺表潰瘍或糜爛等。巨細(xì)胞病毒性結(jié)腸炎病變有散在性及局灶性兩種。散在性者病變侵犯整個胃腸道,但程度不一。鋇灌腸示結(jié)腸袋形消失,腸腔輕度狹窄,腸黏膜可有肉芽腫、糜爛及淺表潰瘍等。節(jié)段性者以侵犯盲腸及末端回腸為主。X線造影顯示盲腸痙攣,黏膜皺襞不規(guī)則增厚及表淺的鵝口瘡樣潰瘍,但應(yīng)與潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病的X線表現(xiàn)相鑒別。上述X線表現(xiàn)均為非特異性的,應(yīng)結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。必要時(shí)應(yīng)配合內(nèi)鏡加活檢以確診。

  (2)卡波齊肉瘤:卡波齊肉瘤可發(fā)生在胃腸道的任何部位。食管卡波齊肉瘤在X線片上顯示食管中段呈多發(fā)性腔內(nèi)息肉樣病變。胃卡波齊肉瘤表現(xiàn)為胃遠(yuǎn)端散在性、多發(fā)性無蒂的黏膜下缺損,輪廓光滑,直徑幾毫米至幾厘米。少數(shù)病變中央有鋇劑積聚,顯示“牛眼征”,在充氣擴(kuò)張的胃內(nèi)還可見不規(guī)則增厚的黏膜皺襞。十二指腸卡波齊肉瘤為球部內(nèi)黏膜下結(jié)節(jié)或輕度斑片狀隆起。小腸卡波齊肉瘤為多發(fā)性結(jié)節(jié)伴中央潰瘍。結(jié)腸卡波齊肉瘤以直腸最明顯,表現(xiàn)為整個結(jié)腸黏膜下散在的結(jié)節(jié)狀充盈缺損,直徑幾毫米至幾厘米不等。較晚期患者結(jié)節(jié)融合和環(huán)形浸潤腸壁,使直腸狹窄和僵直。

  2.胸部X線檢查 常見的機(jī)會性感染有卡氏肺孢菌肺炎,惡性腫瘤有卡波齊(Kaposi)肉瘤。

  (1)卡氏肺孢菌肺炎:典型X線表現(xiàn)是:初起時(shí)兩肺先出現(xiàn)混合性肺泡及間質(zhì)炎性改變,以肺門周圍散在性網(wǎng)狀結(jié)節(jié)樣間質(zhì)浸潤為主,從肺門向外擴(kuò)展。隨后在數(shù)日內(nèi)病變進(jìn)入肺泡,發(fā)展成肺泡性實(shí)變,在肺野內(nèi)形成均勻斑片狀實(shí)變影,其間夾雜有廣泛性或局灶性肺氣腫或小段肺不張,以肺外圍最明顯。呈粗糙的或細(xì)顆粒狀的“毛玻璃樣”表現(xiàn),病變可僅限于一個肺葉,也可彌漫分布。有時(shí)片狀陰影可融合成大片狀均勻致密的浸潤影,呈向心性分布,與肺水腫的X線特征很相似。也可在“毛玻璃樣”背景上出現(xiàn)結(jié)節(jié)狀病灶。在肺周圍還可有條狀陰影,有些則僅表現(xiàn)為粗結(jié)節(jié)陰影。但這些X線表現(xiàn)沒有特異性,確診需要反復(fù)經(jīng)纖維支氣管鏡檢找到病原。不典型X線表現(xiàn)有:肺大葉性實(shí)變,可一葉也可多葉實(shí)變;肺空腔形成或胸腔積液;肺泡內(nèi)滲出物亦可鈣化等。應(yīng)注意與肺結(jié)核或肺部真菌感染相鑒別。胸內(nèi)淋巴結(jié)增大,主要是位于縱隔、右氣管旁及兩側(cè)肺門的淋巴結(jié)增大。有的病例甚至無呼吸系統(tǒng)癥狀出現(xiàn),而僅于X線片上顯示胸內(nèi)淋巴結(jié)增大,以后才被證實(shí)為獲得性免疫缺陷綜合征。此種X線表現(xiàn)強(qiáng)烈提示肺內(nèi)有嚴(yán)重感染或腫瘤存在,需作纖維支氣管鏡或淋巴結(jié)活檢。

  (2)卡波齊肉瘤:最常見的X線異常是肺間質(zhì)浸潤,約占肺卡波齊肉瘤患者的80%。此外,可見肺野內(nèi)直徑<1cm的、境界不清楚的多發(fā)性小結(jié)節(jié)影及明顯的條狀陰影。常伴有縱隔及肺門淋巴結(jié)增大,也可有胸腔積液。當(dāng)X線表現(xiàn)不明顯時(shí),CT檢查有助診斷。

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